薄膜过滤法是一种利用微孔滤膜进行过滤的技术,主要用于去除小颗粒及溶解盐。该方法通过具有微孔的滤膜截留流体中的微生物或其他颗粒物,然后将其转移到合适的培养基上进行培养和菌落计数1
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薄膜过滤法的原理和应用
薄膜过滤法的原理是将待测液体通过一张具有微孔的薄膜,使液体中的微生物被滞留在薄膜表面,从而实现微生物的分离和检测。这种薄膜通常由聚酯、聚碳酸酯、聚丙烯等材料制成,具有一定的孔径大小,可以根据需要选择不同孔径的薄膜3
。当被检样品通过过滤膜时,大部分微生物会被膜上的孔隙阻挡,而溶解在水中的溶质和微小的颗粒则可以通过膜孔隙进入下方的收集容器中,这样就能实现对微生物的有效分离和浓缩3
。
薄膜过滤法的优缺点
优点:
- 不受样品体积限制:薄膜过滤法可以处理较大体积的样品,适用于各种规模的实验需求。
- 高灵敏度:能够检测到低浓度的微生物,适用于对微生物含量要求严格的实验。
- 去除抑制物:该方法可以通过冲洗步骤去除样品中的抑制物,提高检测的准确性。
缺点:
- 操作复杂:需要严格的实验操作和设备要求,不适合非专业人员操作。
- 设备成本高:高质量的滤膜和设备成本较高,增加了实验的成本。
薄膜过滤法在微生物检测中的应用实例
在微生物限度检测和无菌检测中,薄膜过滤法被广泛应用。例如,在药物生产过程中,通过对药物样品进行薄膜过滤,可以检测其中是否存在微生物污染,确保药品的安全性4
。此外,在环境监测和水质检测中,薄膜过滤法也用于检测水样中的微生物含量
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薄膜过滤法:
本法适用于有抗菌作用或大容量的供试品。
按集菌使用规程安装好集菌仪。
取供试品擦拭消毒后,除去塑料盖,插好导管,进行抽滤,滤液从排液管排出。
同法操作将培养基抽到全封闭式集菌培养器中。
取需气菌、厌气菌培养基和真菌培养基各1管,同法操作加入相应的溶剂作阴性对照。
阳性对照管应根据供试品特性在接种橱内加入相应对照菌液1ml。(抗细菌药物以金黄色葡萄球菌为对照菌,抗厌氧菌药物以生孢梭菌为对照菌,抗真菌药物以白色念珠菌为对照菌)。
需气菌、厌气菌培养基管置30-35℃培养箱中,真菌培养基管置20-25℃培养箱中各培养7日;阳性对照管细菌应在培养24-48小时,真菌应在培养24-72小时有菌生长。