circ-0008102过表达与敲低:ZETA life转染试剂在K562细胞中的应用
️1. 文章主要研究方向
️• 期刊:European Journal of Pediatrics
️• DOI:https://doi.org/10.1007/s00431-023-05398-y(https://doi.org/10.1007/s00431-023-05398-y)
️• 研究方向:
本研究探讨了外周血环状RNA circ-0008102 在β-地中海贫血(β-thalassemia, β-thal)患者中的表达及其作为新型临床生物标志物的潜力。研究发现,circ-0008102在未输血治疗的β-thal患儿中显著上调,并通过调控γ-珠蛋白表达参与疾病进展。
️2. ZETA life Advanced DNA RNA转染试剂(货号:AD600150)的应用
️• 转染细胞:K562细胞(人慢性髓系白血病细胞系)。
️ • 转染基因:
️ ◦️circ-0008102过表达载体(circ-0008102 overexpression vector)
️◦circ-0008102 siRNA(si-circ-0008102,序列:5'-GAACGGGGACACUUAGUCGTT-3')
️◦阴性对照(si-control,序列:5'-UUCUCCGAACGUGUCACGUTT-3')
️3. 转染实验数据及解读
️• 实验数据来源:
️ ◦Supplementary Fig. S1:circ-0008102过表达或敲低对γ-珠蛋白mRNA表达的调控(P<0.05)。
️ ◦Supplementary Fig. S3:circ-0008102过表达抑制miR-372-3p、miR-329-5p等5种miRNA的表达(P<0.001),敲低则增加其表达(P<0.05)。
️ • 数据解读:
◦ZETA life转染试剂高效递送circ-0008102载体和siRNA至K562细胞,验证了circ-0008102通过调控γ-珠蛋白和miRNAs参与β-thal的分子机制。
◦转染效率高,数据重复性好,支持了circ-0008102作为生物标志物的结论。
️ • 主要贡献:
️◦为circ-0008102功能研究提供可靠的基因操作工具。
️ ◦证实circ-0008102通过miRNA海绵作用调控下游靶基因。