阿鲁巴星人的回答：
停止细菌增殖
加入金属离子后，细胞膜低温容易形成液晶态，转化效率高。
️感受态细胞的製备时有什么注意事项
天寂无痕的回答：
1、培养温度。较低的温度培养有利于感受态的形成，这样可以获得较高的感受态，但太低又不实用，因而产生了 inoue 的高效感受态製备方法，它实际是利用了所有有利于感受态的文献而得出的一
个非常理想方法。
2、在储存感受态时，dmso 要比甘油的效果要好，它会使感受态的效率增加。
3、液氮速冻也会使感受态的效率提高，因此推荐用液氮速冻感受态，然后储存于超低温冰箱内。
4、冻存的感受态用一次拿一管，不要反覆冻融。化冻之后立即使用，不要冰上放太久。
5、操作时可以轻弹轻甩，儘量避免用移液器吹吸。
y神级第六人的回答：
（1）质粒dna的质量和浓度：
用于转化的质粒dna应主要是超螺旋态的，转化率与外源dna的浓度在一定範围内成正比，但当加入的外源dna的量过多或体积过大时，则会使转化率下降。一般地，dna溶液的体积不应超过感受态细胞体积的5%，1ng的cccdna即可使50ul的感受态细胞达到饱和。对于以质粒为载体的重组分子而言，分子量大的转化效率低，实验证明，大于30kb的重组质粒将很难进行转化。
此外，重组dna分子的构型与转化效率也密切相关，环状重组质粒的转化率较分子量相同的线性重组质粒高10~100倍，因此重组dna大都构成环状双螺旋分子。
（2）感受态细胞的质量：
所用的cacl2等试剂均需是最高纯度的，并用最纯净的水配製，最好分装储存于4℃
（3）细胞的生长状态和密度
最好从-70℃或-20℃甘油储存的菌种中直接转接用于製备感受态细胞的菌液。不要用已经过多次转接，及贮存在4℃的培养菌液。细胞生长密度以每毫升培养液中的细胞数在5×107个左右为佳。
即应用对数期或对数生长前期的细菌，可通过测定培养液的od600控制。对tg1菌株，od600为0．5时，细胞密度在5×107个/ml左右。（应注意od600值与细胞数之间的关係随菌株的不同而不同）。
密度过高或不足均会使转化率下降。
（二）感受态细胞转化中的影响：
整个操作过程均应在无菌条件下进行，所用器皿，如离心管，移液枪头等最好是新的，并经高压灭菌处理。所有的试剂都要灭菌，且注意防止被其它试剂、dna酶或杂dna所汙染，否则均会影响转化效率或杂dna的转入。整个操作均需在冰上进行，不能离开冰浴，否则细胞转化率将会降低。
️製备感受态细胞时,应特别注意哪些环节?
凉了的的回答：
1、整个实验过程均需置于冰上进行。
2、选用对数生长期细胞，od600在0.4~0.5间。
3、所有操作必须做到严格无菌，防止杂菌和杂dna的汙染。
4、动作不应太剧烈，减少细胞的机械损伤。
的回答：
保证感受态细胞的活性，所有操作儘量在冰上，暴露在空气中的时间儘量短。
冯雨凝的回答：
1、整个实验过程均需置于冰上进行。
2、选用对数生长期细胞，od600不应高于0.5。
冰浴过程中，原来加在溶液中的钙离子和细菌细胞膜结合，在低温下形成液晶结构，这样，在42度热激下，这种液晶结构收缩，将细胞膜扯开孔道，使dna进入细菌细胞中。这就是原理。在0 4 cacl2低渗溶液中，细胞膨胀成球状，转化混合物中的dna形成抗dna酶的羟基 钙磷酸複合物黏附于细胞表面，较低的温度也降...
方法一 细菌转化的方法多以mendel和higa 1970 的发现为基础，其基本方法是用冰预冷的cacl2或多种2价阳离子等处理细菌，使之进入感受态得以转化。用cacl2製备新鲜或冷冻的大肠桿菌感受态细胞，常用于成批製备感受态细菌。感受态细胞的製备和转化中 为什么要加两次cacl2?cacl2为什么...
您好，感受态细胞收到过点选或者氯化钙氯化铯等的处理，细胞壁以及细胞膜都有损伤，可以说是十分脆弱的细胞，如果放于 20 储存，时间长了细胞内部液化度较高的情况下，细胞会由于流动性的原因造成不可逆损伤，甚至死亡。所以要放于 80摄氏度。首先你要明白，冻存的细胞，温度越低，储存的时间越长，像哺乳类细胞冻 ...
